-
分段盐析 编辑
盐析是指向蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐,以破坏蛋白质的胶体稳定性,使蛋白质的溶解度降低而从溶液中沉淀析出的过程。改变盐的浓度与溶液的pH值,便可将混合液中的蛋白质逐个盐析分开,这种分离蛋白质的操作称为分段盐析。如:血清球蛋白(50%(NH4)2SO4饱和度),清蛋白(饱和(NH4)2SO4)。
蛋白质的分子很大,其颗粒在胶体颗粒范围(直径1~100nm)内,所以不能透过半透膜。选孔径合宜的半透膜,由于小分子物质能够透过,而蛋白质颗粒不能透过,因此可使蛋白质和小分子物质分开。这种方法可除去和蛋白质混合的中性盐及其他小分子物质。这种技术叫做透析,是常用来纯化蛋白质的方法。由盐析所得的蛋白质沉淀,经过透析脱盐后仍可恢复其原有结构及生物活性。
2. 每一段盐析静置之后都将离心取沉淀,透析并检测活性。通过实验结果可以看出哪一段盐析出来的目的产物最多,相对来说杂质就更少。
3. 比如实验中的活性物质主要在60%-80%这段出来,在以后的实验中,就可以首先进行0%-60%的硫酸铵沉淀,这段沉淀物可以抛弃(去除大多数杂质);然后进行60%-80%的硫酸铵沉淀,这段沉淀出来是物质是所需要的目的物质含量比较高的物质,将其收集进行下一步纯化工作 。
1、本站所有文本、信息、视频文件等,仅代表本站观点或作者本人观点,请网友谨慎参考使用。
2、本站信息均为作者提供和网友推荐收集整理而来,仅供学习和研究使用。
3、对任何由于使用本站内容而引起的诉讼、纠纷,本站不承担任何责任。
4、如有侵犯你版权的,请来信(邮箱:baike52199@gmail.com)指出,核实后,本站将立即删除。